При постановке реакции берут столько рядов стерильных пробирок, сколько испытывают сывороток; количество пробирок в каждом ряду должно соответствовать числу разведений вируса.
В первом ряду контрольных пробирок должна быть нормальная сыворотка соответствующего вида животного или сыворотка человека, во втором ряду — физиологический раствор или бульон.
К разлитым сывороткам добавляют в равном объеме разные разведения вируса, как это показано в таблице II; желательно добавлять вирус отдельной пипеткой для каждого разведения.
0~месь Х0Р°ш° встряхивают и инкубируют при температуре 37 С в течение одного-двух часов. Часто применяется длительное (в течение 18 часов) выдерживание при температуре 2-4°С. После этого смесь вводят восприимчивым животным, учитывая тропизм вируса: при нейротропных инъекциях — в мозг, при пневмотронных — через нос, при дермотропных — внутрикожно и т. д. Каждым разведением заражают четыре-пять мышей. Животные служат показателями реакции нейтрализации.
Учет результатов реакции производят по количеству заболевших или павших животных в течение промежутка времени, превосходящего обычный для данной инфекции инкубационный период не менее чем вдва-три раза. Оценка результатов реакции нейтрализации учитывается по так называемому индексу нейтрализации иммунных сывороток, рекомендуемому Ридом и Меняем. Результаты реакции считаются положительными, если в опыте выживает 50% мышей, резко положительными, если количество выживших мышей превышает 75% по отношению к погибшим в контрольном опыте.
В опыт с каждой сывороткой и в контрольных опытах взято по 20 мышей. В контрольных опытах погибло по 17 из 20 мышей; в опыте с сывороткой № 2 погибло 13, а с сывороткой № 1 — три мыши. Резко положительную нейтрализацию показала только сыворотка
Индекс нейтрализации является разностью логарифмических показателей титров вируса в присутствии контрольной и нормальной сыворотки. Для сыворотки № 1 разность будет 4,77-1,23 = 3,54; для сыворотки № 2-4,77-3,77=1. Число антилогарифмов, поданное в таблице, будет индексом нейтрализации.