Вы находитесь здесь: Главная > Изучение реакций > Морфологические различия спирохеты вшивой и клещевой формы
Сен 19 2012
За титр инфекционности принимается наивысшее разведение вируса в 0,1 мл, которое вызывает цитопатогенные изменения во всех пробирках и обозначается как ИД (инфекционная доза) или цитопатогенная доза.
Реакция связывания комплемента. Для серологической диагностики аденовирусных заболеваний применяется реакция связывания комплемента и реакция нейтрализации вируса.
Кровь для серологических реакций берется в первый-третий и 14-21-й день заболевания. Сыворотка перед постановкой реакции инактивируется при температуре 56° С 30 минут. Методика реакции связывания комплемента аналогична методике, применяемой при бактериологических исследованиях. Специфическая система берется в количестве 0,5 мл: 0,25 мл антигена (культураль-ная жидкость, содержащая вирус) и 0,25 мл исследуемой сыворотки больного в разведении от 1 : 5 до 1 : 160. Гемолитическая система состоит из 0,25 мл 3% отмытых бараньих эритроцитов и 0,25 мл гемолитической сыворотки кролика в разведении 1 : 200. В реакции используется комплемент морской свинки в объеме 0,5 мл в количестве 2 единиц. Гемолитическая система добавляется после инкубирования специфической системы в течение часа при температуре 37° С. Учет реакции производится после инкубирования обеих систем в течение 30 минут. Титром сыворотки считается наибольшее инициальное разведение ее, дающее полную задержку гемолиза. Г. Перейра рекомендует реакцию связывания комплемента ставить на пластинках для гемагглютинации. Сыворотка и антиген в количестве по 0,1 мл смешиваются с двумя минимальными гемолитическими дозами комплемента в объеме 0,1 мл. Смесь выдерживается при температуре +4° С ночь, затем ставится в термостат на 30 минут при температуре 37° С. После этого в нее добавляется 0,2 мл гемолитической системы, состоящей из равного объема раствора гемолизина, содержащего 2 минимальные гемолитические дозы, и 2% взвеси отмытых эритроцитов барана. Потом смесь снова инкубируют при температуре 37° С в течение 30 минут, встряхивают несколько раз с десятиминутными интервалами и помещают в рефрижератор при температуре +4° С на 2-4 часа. Титр устанавливается по наивысшему инициальному разведению сыворотки, давшему 50″о гемолиза. Автор рекомендует прогревать антиген при температуре 56° С 30 минут и употреблять его в разведениях от 1 : 10 до 1 : 640. При исследовании парных сывороток диагностическим является нарастание титра комплементфиксирующих антител до 1 : 40; 1 : 80.
